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    如何利用液氮將菌種在-80℃低溫冷凍保藏

    時間:2020-08-21 10:13來源: 作者:ydgmve2020yyx 點擊:
    將菌種保藏在-80 ℃冰箱中以減緩細胞的生理活動進行冷凍的一種保藏方法。液氮罐廠家分享其操作步驟如下: 查特液氮罐 *先做好安瓿管的準備 安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管
    將菌種保藏在-80 ℃冰箱中以減緩細胞的生理活動進行冷凍的一種保藏方法。液氮罐廠家分享其操作步驟如下:查特液氮罐

    *先做好安瓿管的準備

    安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時,先用2%鹽酸浸泡過夜,自來水沖洗干凈后,用蒸餾水浸泡至pH中性,干燥后、貼上標簽,標上菌號及時間,加入脫脂棉塞后,121 ℃下高壓滅菌(15~20) min,備用。

    如何利用液氮將菌種在-80℃低溫冷凍保藏

    其次要做好保護劑的選擇和準備

    保護劑種類要根據微生物類別選擇。配制保護劑時,應注意其濃度及pH值,以及滅菌方法。如血清,可用過濾滅菌;牛奶要先脫脂,用離心方法去除上層油脂,一般在100 ℃間歇煮沸2~3次,每次(10~30) min,備用。

    之后注重微生物保藏物的準備

    在*適宜的培養條件下將細胞培養至靜止期或成熟期,進行純度檢查后與保護劑混合均勻,分裝。微生物培養物濃度以細胞或孢子不少于(108-1010)個/mL為宜(以大腸桿菌(Escherichia coli)為例,為了取得每毫升1010個活細胞菌液2 mL~2.5 mL,只需10 mL瓊脂斜面兩支)。

    采用較長的毛細滴管,直接滴入安瓿管底部,注意不要濺污上部管壁,每管分裝量約(0.1~0.2) mL,若是球形安瓿管,裝量為半個球部。若是液體培養的微生物,應離心去除培養基,然后將培養物與保護劑混勻,再分裝于安瓿管中。分裝安瓿管時間盡量要短,*好在(1~2) mL內分裝完畢并預凍。分裝時應注意在無菌條件下操作。

    接著進行凍結保藏

    將安瓿管或塑料凍存管置于-80 ℃環境中保藏。

    *后,咱們還得知道,冷藏后如果要取出使用的復蘇方法。從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置38 ℃~40 ℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為止,約需50 s~100 s。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養基上進行培養。查特液氮罐
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